Health and Wellness

Efeito da variação da temperatura no desenvolvimento embrionário murino

By Dóris Ferreira Moriyama

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Length3h

About this audiobook

Quem trabalha direta ou indiretamente com Reprodução Assistida (RA) sabe o quanto ela é uma ciência em construção. Embora não conheçamos a biologia por trás dos processos muito bem orquestrados em uma fertilização fisiológica, a biotecnologia e os laboratórios conseguem com um sucesso notável gerar e desenvolver os embriões nos primeiros dias de desenvolvimento. O livro da Dra. Dóris Ferreira Moriyama visa entender como um dos fatores corriqueiros dentro da gestão de qualidade de um laboratório de RA, que muitas vezes é negligenciado, a temperatura de cultivo embrionário, pode ter um grande impacto no desfecho de uma paciente que precisa dessa biotecnologia para realizar o sonho da maternidade. Como muito bem esclarecido pela autora, sabemos que a temperatura ambiental ao longo da fertilização e desenvolvimento embrionário em mamíferos sofre gradientes. No entanto, ainda não conhecemos com exatidão os valores na mulher. A temperatura pode parecer algo simples de ser controlado para quem não conhece como funcionam os processos de fertilização in vitro, mas nem sempre é possível manter a temperatura desejável de forma estável durante todas as etapas. Este livro nos abre a mente e nos alerta sobre como as variações de temperatura, principalmente para baixo do ideal, podem repercutir negativamente no desenvolvimento embrionário, influenciando nos aspectos moleculares e morfocinéticos embrionários. Dra. Maite del Collado

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GenreHealth and Wellness

Length3 hrs

Narrated byListen with 1,000+ voices

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Publish dateJul 19, 2023

LanguagePortuguese

1Introduction

314.4.9 Coleta de meio de cultura e extração dos aminoácidos para a análise metabolômica

21 INTRODUÇÃO GERAL E JUSTIFICATIVA

324.5 ANÁLISE ESTATÍSTICA

32 HIPÓTESE

335 RESULTADOS

43 OBJETIVOS

345.1 EXPERIMENTO I

53.1 OBJETIVO GERAL

355.1.1 Avaliação das taxas de clivagem, mórula e blastocisto.

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63.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS

365.1.2 Classificação morfológica dos blastocistos em D5

73.2.1 Experimento I

375.1.3 Teste TUNEL nos blastocistos

83.2.2 Experimento II

385.1.4 Metabolômica do meio de cultura

94 MÉTODOS

395.2 EXPERIMENTO II

104.1 CONSTRUÇÃO DOS GRUPOS DE ESTUDO

405.2.1 Taxa de blastocisto

114.2 DELINEAMENTO EXPERIMENTAL

415.2.2 Análise da morfocinética embrionária

124.3 EXPERIMENTO I

425.2.3 Classificação morfológica dos blastocistos em D5

134.3.1 Delineamento experimental detalhado e modelo animal

435.2.4 Expressão relativa dos genes Igf2, Bax, Bcl2 e Apaf1 nos blastocistos

144.3.2 Incubadoras e variação da temperatura

445.2.5 Metabolômica do meio de cultura

154.3.3 Estimulação ovariana

456 DISCUSSÃO

164.3.4 Coleta dos zigotos e cultivo embrionário in vitro

466.1 TAXA DE BLASTOCISTO

174.3.5 Avaliação das taxas de clivagem, mórula e blastocisto

476.2 MORFOCINÉTICA EMBRIONÁRIA

184.3.6 Classificação morfológica dos blastocistos

486.3 A CLASSIFICAÇÃO MORFOLÓGICA DOS BLASTOCISTOS

194.3.7 Teste TUNEL

496.4 TESTE TUNEL E ANÁLISE DA EXPRESSÃO GÊNICA RELATIVA EM BLASTOCISTOS

204.3.8 Coleta de meio de cultura para metabolômica e extração dos metabólitos pelo método de Bligh Dyer

506.5 METABOLÔMICA DO MEIO DE CULTURA

214.3.9 Metabolômica

517 CONSIDERAÇÕES FINAIS

224.4 EXPERIMENTO II

528 CONCLUSÃO

234.4.1 Delineamento experimental detalhado e modelo animal

539 REFERÊNCIAS

244.4.2 Incubadora e variação da temperatura

54ANEXOS

254.4.3 Descongelamento de embriões

55ANEXO I: IMPLEMENTAÇÃO DA TÉCNICA DE TRANSFERÊNCIA EMBRIONÁRIO NÃO-CIRÚRGICA.

264.4.4 Cultivo embrionário in vitro e análise da morfocinética embrionária

56ANEXO II: ANÁLISE ESTATÍSTICA COMPLEMENTAR DA CM (IQ) E TESTE TUNEL EM UM MESMO MODELO ESTATÍSTICO NO EXPERIMENTO I (N=181).

274.4.5 Seleção dos genes de interesse para análise de expressão relativa

57ANEXO III: CONJUNTO DE AMINOÁCIDOS PADRÃO NECESSÁRIOS PARA A SÍNTESE DE PROTEÍNAS (ADAPTADO DE STURMEY ET AL., 2008).

284.4.6 Extração de RNA dos blastocistos

58ANEXO IV: COMPOSIÇÃO MEIO DE CULTURA CONTINUOUS SINGLE CULTURE COMPLETE (CSCM-C), IRVINE SCIENTIFIC (SANTA ANA, USA).

294.4.7 Transcrição reversa e produção de cDNA

59ANEXO V: ARTIGO REFERENTE A TESE PUBLICADA EM REVISTA INTERNACIONAL: SCIENTIFIC REPORTS

304.4.8 PCR Quantitativo em tempo real (qRT-PCR)

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