
Efeito da variação da temperatura no desenvolvimento embrionário murino
By Dóris Ferreira MoriyamaLength3h
About this audiobook
Quem trabalha direta ou indiretamente com Reprodução Assistida (RA) sabe o quanto ela é uma ciência em construção. Embora não conheçamos a biologia por trás dos processos muito bem orquestrados em uma fertilização fisiológica, a biotecnologia e os laboratórios conseguem com um sucesso notável gerar e desenvolver os embriões nos primeiros dias de desenvolvimento. O livro da Dra. Dóris Ferreira Moriyama visa entender como um dos fatores corriqueiros dentro da gestão de qualidade de um laboratório de RA, que muitas vezes é negligenciado, a temperatura de cultivo embrionário, pode ter um grande impacto no desfecho de uma paciente que precisa dessa biotecnologia para realizar o sonho da maternidade. Como muito bem esclarecido pela autora, sabemos que a temperatura ambiental ao longo da fertilização e desenvolvimento embrionário em mamíferos sofre gradientes. No entanto, ainda não conhecemos com exatidão os valores na mulher.
A temperatura pode parecer algo simples de ser controlado para quem não conhece como funcionam os processos de fertilização in vitro, mas nem sempre é possível manter a temperatura desejável de forma estável durante todas as etapas. Este livro nos abre a mente e nos alerta sobre como as variações de temperatura, principalmente para baixo do ideal, podem repercutir negativamente no desenvolvimento embrionário, influenciando nos aspectos moleculares e morfocinéticos embrionários. Dra. Maite del Collado
Audiobook details
GenreHealth and Wellness
Length3 hrs
Narrated byListen with 1,000+ voices
FormateBook with Audio
Publish dateJul 19, 2023
LanguagePortuguese
Table of contents
1Introduction
21 INTRODUÇÃO GERAL E JUSTIFICATIVA
32 HIPÓTESE
43 OBJETIVOS
53.1 OBJETIVO GERAL
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63.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS
73.2.1 Experimento I
83.2.2 Experimento II
94 MÉTODOS
104.1 CONSTRUÇÃO DOS GRUPOS DE ESTUDO
114.2 DELINEAMENTO EXPERIMENTAL
124.3 EXPERIMENTO I
134.3.1 Delineamento experimental detalhado e modelo animal
144.3.2 Incubadoras e variação da temperatura
154.3.3 Estimulação ovariana
164.3.4 Coleta dos zigotos e cultivo embrionário in vitro
174.3.5 Avaliação das taxas de clivagem, mórula e blastocisto
184.3.6 Classificação morfológica dos blastocistos
194.3.7 Teste TUNEL
204.3.8 Coleta de meio de cultura para metabolômica e extração dos metabólitos pelo método de Bligh Dyer
214.3.9 Metabolômica
224.4 EXPERIMENTO II
234.4.1 Delineamento experimental detalhado e modelo animal
244.4.2 Incubadora e variação da temperatura
254.4.3 Descongelamento de embriões
264.4.4 Cultivo embrionário in vitro e análise da morfocinética embrionária
274.4.5 Seleção dos genes de interesse para análise de expressão relativa
284.4.6 Extração de RNA dos blastocistos
294.4.7 Transcrição reversa e produção de cDNA
304.4.8 PCR Quantitativo em tempo real (qRT-PCR)
314.4.9 Coleta de meio de cultura e extração dos aminoácidos para a análise metabolômica
324.5 ANÁLISE ESTATÍSTICA
335 RESULTADOS
345.1 EXPERIMENTO I
355.1.1 Avaliação das taxas de clivagem, mórula e blastocisto.
365.1.2 Classificação morfológica dos blastocistos em D5
375.1.3 Teste TUNEL nos blastocistos
385.1.4 Metabolômica do meio de cultura
395.2 EXPERIMENTO II
405.2.1 Taxa de blastocisto
415.2.2 Análise da morfocinética embrionária
425.2.3 Classificação morfológica dos blastocistos em D5
435.2.4 Expressão relativa dos genes Igf2, Bax, Bcl2 e Apaf1 nos blastocistos
445.2.5 Metabolômica do meio de cultura
456 DISCUSSÃO
466.1 TAXA DE BLASTOCISTO
476.2 MORFOCINÉTICA EMBRIONÁRIA
486.3 A CLASSIFICAÇÃO MORFOLÓGICA DOS BLASTOCISTOS
496.4 TESTE TUNEL E ANÁLISE DA EXPRESSÃO GÊNICA RELATIVA EM BLASTOCISTOS
506.5 METABOLÔMICA DO MEIO DE CULTURA