Caracterização Genética de Isolados de Toxoplasma gondii
Da Microrregião Ilhéus-Itabuna, Bahia, BrasilBy Jamille Rodrigues da Silva
Length1h 39m
About this audiobook
Os cães têm importância epidemiológica por atuarem como sentinelas da toxoplasmose humana, sendo bons indicadores de contaminação ambiental. Objetivou-se com este estudo isolar e caracterizar geneticamente cepas de T. gondii oriundas de tecidos de cães naturalmente infectados dos municípios de Ilhéus e Itabuna, Bahia, Brasil. Para isto, foi coletado sangue de 21 cães provenientes dos CCZs dos respectivos municípios, seus soros foram testados para presença de anticorpos para T. gondii pela Hemaglutinação Indireta. Cérebros e corações dos cães soropositivos foram digeridos e inoculados em camundongos para isolamento do parasita. A caracterização das cepas de T. gondii foi feita pela técnica de PCR-RFLP utilizando 10 marcadores genéticos (SAG1, SAG2 novo, SAG3, BTUB, C22-8, C29-2, GRA6, PK1, APICO e L358). O resultado sorológico apontou sete cães sororreagentes. Entretanto, no ensaio biológico, T. gondii foi isolado de apenas 4 cães soropositivos, nomeados como TgDgBr 6, 13, 17 e 21 respectivamente. Todas as cepas foram virulentas, provocando alterações clínicas nos camundongos. A caracterização genética destes 4 isolados indicou 4 genótipos únicos, todos com diferentes combinações das linhagens clonais (I, II e III) e 2 genótipos apresentando alelos atípicos. A RFLP com uso de vários marcadores demonstrou ser capaz de detectar a variabilidade genética das cepas circulantes na Bahia, e consequentemente apontar a diversidade genética do parasito nesta região.
Audiobook details
GenreScience and Nature
Length1 hr 39 mins
Narrated byListen with 1,000+ voices
FormateBook with Audio
Publish dateJun 28, 2022
LanguagePortuguese
Table of contents
1Introduction
21. INTRODUÇÃO
32. OBJETIVOS
42.1. OBJETIVO GERAL
52.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS
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63. REVISÃO DE LITERATURA
73.1. TOXOPLASMA GONDII
83.2. CICLO BIOLÓGICO DE TOXOPLASMA GONDII
93.2.1. CICLO EXTRA-INTESTINAL
103.2.2. CICLO INTESTINAL
113.3. FONTES DE INFECÇÃO DE TOXOPLASMA GONDII
123.4. TOXOPLASMA GONDII EM CÃES
133.5. BIOLOGIA MOLECULAR DE TOXOPLASMA GONDII
144. MATERIAL E MÉTODOS
154.1. COLETA DAS AMOSTRAS SANGUÍNEAS DOS CÃES
164.2. SOROLOGIA
174.3. OBTENÇÃO DAS AMOSTRAS TECIDUAIS DE CÃES
184.4. ISOLAMENTO DE TOXOPLASMA GONDII EM CAMUNDONGOS
194.4.1. DIGESTÃO PÉPTICA
204.4.2. ENSAIO BIOLÓGICO EM CAMUNDONGOS ALBINOS
214.4.3. OBSERVAÇÃO DOS CAMUNDONGOS
224.5. ANÁLISE MOLECULAR DE TOXOPLASMA GONDII
234.5.1 DIAGNÓSTICO MOLECULAR DE TOXOPLASMA GONDI
244.5.1.1 EXTRAÇÃO DE DNA DAS AMOSTRAS TECIDUAIS DE CAMUNDONGOS INFECTADOS
254.5.1.2. QUANTIFICAÇÃO DE DNA
264.5.1.3. DETECÇÃO DE TOXOPLASMA GONDII PELA REAÇÃO EM CADEIA DE POLIMERASE (PCR)
274.5.2. CARACTERIZAÇÃO GENÉTICA DE TOXOPLASMA GONDII: 4.5.2.1. PCR-RFLP
285. RESULTADOS
296. DISCUSSÃO
307. CONCLUSÕES
31ANEXOS
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